Анализы на коклюш (Bordetella pertussis): о чем могут рассказать антитела

Коклюш — это бактериальная инфекция, вызываемая коккобациллой Bordetella pertussis. Для диагностики этого заболевания используются различные лабораторные исследования; правильный анализ на коклюш позволит определить не только наличие болезни, но и ее стадию.

Дифференциальная диагностика

Заподозрить коклюш следует при наличии у больного следующих симптомов:

Анализы на коклюш, диагностика коклюша, обследования

  • кашель неясного происхождения продолжительностью более 2 недель;
  • приступы тяжелого кашля;
  • симптомы ОРВИ после контакта с больным.

Диагностика коклюша начинается с дифференциации его с острыми респираторными болезнями, гриппом, корью, обострением бронхиальной астмы, бронхоаденитом и попаданием в дыхательные пути инородного тела.

Дифференциальный диагноз основывается на следующих чертах похожих заболеваний:

  1. Грипп начинается остро, наблюдаются симптомы интоксикации (лихорадка, нейротоксикоз), которые преобладают над симптомами поражения верхних дыхательных путей.
  2. Корь отличается присутствием насморка, чихания, слезотечения, отечности слизистых оболочек наряду с кашлем, чего также не бывает при коклюше.
  3. ОРВИ, как и грипп, сопровождаются симптомами интоксикации и поражения слизистых. Разные вирусные инфекции могут характеризоваться воспалением глотки, признаками воспаления бронхов, отеком слизистых, конъюнктивитом.
  4. Туберкулез характеризуется схожими приступами сильного кашля. Для дифференциации болезней требуются рентгенография и реакция Манту.

Анализы на коклюш, диагностика коклюша, обследования

При подозрении на коклюш для подтверждения диагноза используются различные лабораторные методы исследования. Основными являются ПЦР и бактериологический анализ на ранних сроках, серологическая диагностика — на поздних.

Общие лабораторные исследования

Общий анализ крови на коклюш позволяет определить состав крови и обнаружить наличие лейкоцитоза. Как и в случае других бактериальных заболеваний, при коклюше количество лейкоцитов на единицу крови возрастает, что свидетельствует об иммунном ответе на поражение возбудителем. Как правило, выделяют концентрацию лейкоцитов, равную 2–7*109/л.

Анализы на коклюш, диагностика коклюша, обследования

Другие общие характеристики крови, как правило, не меняются; сдвиги наблюдаются только в катаральной стадии болезни. Скорость оседания эритроцитов может быть сниженной.

В большинстве случаев гематологическая лабораторная диагностика коклюша ограничивается общим анализом крови; для выявления возможных осложнений также может проводиться биохимическое исследование, дополняемое общим анализом мочи. Если болезнь протекает благоприятно, все показатели будут в норме.

Для дифференциации коклюша с астмой, гриппом и туберкулезом нужно сдать общий анализ мокроты.

Мокрота при нормальном течении болезни является слизистой; если болезнь осложнена пневмонией, к слизи добавляется гной.

Анализы на коклюш, диагностика коклюша, обследования

Дополнительно может использоваться генетическое исследование — выделение ДНК возбудителя в мокроте при помощи полимеразной цепной реакции (ПЦР). На поздних стадиях болезни ПЦР неэффективен.

Бактериологическая диагностика

Бакпосев помогает определить заболевание у ребенка или взрослого в течение короткого периода после заражения — колонии возбудителя в питательной среде и температуре 36°С начинают появляться уже на 3–5 сутки.

Посев на коклюш делается на материале из носоглотки пациента — мокроте, слизи, собранном при кашле или искусственным путем.

Собирается материал с задней стенки глотки, через 2–3 ч после приема пищи. Применяется три метода сбора слизи:

Анализы на коклюш, диагностика коклюша, обследования

  • «кашлевые пластинки» — больной кашляет на чашку Петри с питательным субстратом, на котором бациллы, попавшие из капель слизи, размножаются в течение 2–4 дней;
  • мазок из зева при помощи тампонов — ватные тампоны, смоченные в альгинате кальция, вводят через нос в носоглотку и оставляют на 10 с, после чего помещают в питательную среду;
  • сбор шприцем через тонкий назальный катетер.

Для бактериологического исследования на коклюш важен правильный выбор питательной среды, так как бацилла Bordetella pertussis размножается только в элективных средах. Вариантов три:

  1. Казеиново-угольный агар. Среда готовится из сухого субстрата, 5 г которого растворяется в 100 мл воды, после чего добавляется цефалексин в концентрации 40 мг/л. Смесь стерилизуется в автоклаве 30 мин при 110°C. Колонии бактерий образуются через 3–4 дня.
  2. Среда Борде-Жангу, используемая, если из-за тяжелого течения болезни анализ на коклюш требует сбора материала непосредственно у постели пациента. Готовится субстрат из 0,5 кг картофеля, 1 л воды и 40 мл глицерина.

Анализы на коклюш, диагностика коклюша, обследования

  1. Молочно-кровяной агар Осиповой. Смешиваются 5% МПА, 1% хлорида натрия и такое же количество теплого обезжиренного молока. Смесь стерилизуется в автоклаве, фильтруется, после чего к ней добавляется 1/5 часть дефибринированной животной крови. Для исключения посторонней флоры добавляется 0,25–0,5 ед. пенициллина на 1 мл среды.

Следует учитывать, что колонии бактерий медленно развиваются — окончательный результат исследования может быть получен лишь на 5–7 сутки после посева. Этот анализ на коклюш эффективен только на ранних сроках заболевания. Из-за особенностей возбудителя окончательный диагноз на основании бактериологической диагностики ставится лишь в 15–25% случаев (данные по г. Санкт-Петербург).

Отличительные признаки колоний

На разных субстратах колонии возбудителя коклюша проявляются по-разному; важно знать их основные признаки, чтобы дифференцировать со схожими колониями бактерий паракоклюша.

КУАМелкие, выпуклые колонии коккобактерий. Блестят, имеют гладкую текстуру и кремовый цвет.Более крупные размеры, окрашивают субстрат в коричневатый оттенок. Бактерии — палочки.
Борде-Жангу и агар ОсиповойГладкие, блестящие колонии коккобактерий. Прозрачные, имеют куполообразную форму и жемчужный оттенок. Окружены четкой гемолизной зоной.Крупные колонии палочек с коричневым цветом среды. Имеется зона слабого гемолиза.

Колонии коклюша нужно также отличать от бактерий септического бронхита. Последние, в отличие от кокков, растут на субстрате без изменения цвета среды и имеют уреазу.

Микроскопическое исследование

Методы диагностики коклюша иногда включают микроскопическое исследование в качестве вспомогательного. Взрослые бактерии коклюша не имеют отличительных морфологических особенностей, но на ранних стадиях развития их можно определить.

На I фазе жизни бактерии имеют S-форму. Они грамотрицательны, отличаются мелкими размерами и однородностью.

Представляют собой палочки без спор с нежными капсулами. На II и III фазах бактерии превращаются в полиморфные или коккоидные формы жизни.

Серологические анализы на коклюш

Поскольку прямые методы исследования (бактериологический и ПЦР) дают результаты только на ранних стадиях развития заболевания, при сроке более 3 недель от заражения используются серологические методы — анализы на антитела к коклюшу. Основная их цель — выявить наличие иммуноглобулинов IgM в крови и IgA в слизи.

Анализы на коклюш, диагностика коклюша, обследования

Основные серологические методы исследования (РПГА, РА, РНГА) применяются также для эпидемиологического анализа. Диагностический титр при реакции пассивной гемагглютинации у непривитого ребенка, не перенесшего коклюш в прошлом — 1:80. У привитых и взрослых пациентов титры считаются диагностическими при нарастании в 4 раза.

Иммуноферментный анализ на иммуноглобулины IgM и IgA — это более современный метод анализа на коклюш у детей и взрослых.

Интерпретировать положительные (+) и отрицательные (-) результаты можно следующим образом:

IgMIgAIgGРасшифровка

коклюш не обнаружен
— или +— или +протекающее заболевание
+— или +коклюш перенесен недавно
+коклюш перенесен давно или была проведена иммунизация

 

Экспресс-анализы на антигены

Существует два метода анализа, позволяющие диагностировать коклюш в сжатые сроки:

Анализы на коклюш, диагностика коклюша, обследования

  1. Иммунофлюоресцентный. Обнаруживает корпускулярные антигены в слизи на стенке глотки. Результат доступен уже через 2–6 ч.
  2. Латексная микроагглютинация. Выявляет антигены B. pertussis в течение 30–40 мин.

ПЦР также является быстрым методом анализа; его недостатком является невозможность применения на поздних сроках заболевания. Экспресс-диагностика коклюша у детей позволяет ускорить постановку диагноза и начало лечения, а также повысить процент лабораторных подтверждений коклюша.

Анализы на коклюш, диагностика коклюша, обследования

Источник: https://opnevmonii.ru/bolezni/koklyush/issledovanie-na-koklyush.html

Анализ на коклюш: современные методы диагностики

Анализы на коклюш, диагностика коклюша, обследования

Возбудителем коклюша является короткая неподвижная грамотрицательная палочка, которая называется Bordetella pertussis. Чаще всего она встречается у детей до пятилетнего возраста. Но иногда поражает дыхательные пути взрослых людей. Чтобы выявить истинную причину заболевания, необходимо сделать анализ на коклюш. Его производят несколькими способами в зависимости от стадии течения воспалительного процесса.

Почему коклюш – заболевание, требующее ранней диагностики?

Палочка рода Бордетеллы передается воздушно-капельным путем, как и любая инфекция, провоцирующая грипп, ОРВИ или другие воспаления дыхательной системы. После ее проникновения в организм развивается коклюш, характеризирующийся циклическим течением с приступообразным судорожным кашлем.

Болезнетворный микроорганизм содержит экзотоксины и эндотоксины. Именно эти компоненты палочки Бордетеллы становятся опасными для организма больного, особенно, если заражение произошло у ребенка возрастом до пяти лет.

Как происходит развитие коклюша?

  1. Инфекция заселяет реснитчатый эпителий дыхательных путей (она не проникает в кровеносную систему и непосредственно внутрь клеток).
  2. Когда палочка погибает, образуется эндотоксин, провоцирующий спазматический кашель. Токсическое вещество усиливает воспаление, вызывает лимфоцитоз, гипогликемию.
  3. Кашлевой рефлекс сохраняется несколько недель. Сначала он характеризируется легким течением, но после закрепления в продолговатом мозгу раздражается блуждающий нерв, поэтому приступы усиливаются и учащаются.
  4. Сформировавшийся очаг возбуждения способен раздражать и другие подкорковые центры вегетативной системы. Именно поэтому при очередном кашлевом приступе у больного может возникнуть рвота, спазм сосудов и даже остановка дыхания.

Очень сложно выявить заболевание в первые недели после заражения, поскольку врачи направляют пациента на анализ крови на коклюш лишь при появлении симптомов патологического процесса.

А возбудитель Бордетелла сразу не вызывает характерных признаков интоксикации острых респираторных инфекций (высокая температура, насморк, кашель, озноб и др.).

Кульминация заболевания выявляется через 2-3 недели после начала циклического течения.

Опасность коклюша в том, что он способен провоцировать развитие осложнений:

  • Поражение бронхолегочных отделов дыхательной системы;
  • Заболевания сердечно-сосудистой системы (кровоизлияния, легочное сердце);
  • Энцефалопатия;
  • Пневмония.

Именно поэтому очень важно как можно раньше сделать анализ крови на коклюш и начать его лечение. Таким образом, удастся избежать осложнений.

Как распознать начало течения коклюша?

Анализы на коклюш, диагностика коклюша, обследования

  1. Инкубационный (от трех до четырнадцати дней).
  2. Катаральный (около двух недель).
  3. Судорожный или спазматический.
  4. Обратное развитие (в среднем длится от двух до 12 недель).

Уже на стадии катарального течения можно сделать анализ на выявление палочки Бордетеллы. В этот период начинает беспокоить сухой навязчивый кашель без повышения температуры. Кашлевые толчки усиливаются к вечеру и не проходят даже после приема противокашлевых препаратов. Других симптомов заболевания не отмечается.

В катаральный период течения коклюша расшифровка анализа периферической крови поможет определить лейкоцитоз, то есть, значительное повышение лейкоцитов. Обычно показатели поднимаются до 15-40*109/л. При этом скорость оседания эритроцитов (СОЭ) остается в норме.

При наступлении судорожного периода все симптомы коклюша станут очевидными. Характерным признаком являются частые кашлевые толчки со свистящим вдохом (реприз). Цикличность кашля повторяется в среднем от 2 до 15 раз. При тяжелом течении у пациентов период может насчитывать 50 циклов.

При этом, внешний вид больного не оставляет сомнений, что у него коклюш:

  • Глаза наливаются кровью;
  • Лицо краснеет или приобретает синюшный оттенок;
  • Язык выталкивается из ротовой полости и свисает с загнутым вверх кончиком;
  • Венозные сосуды головы набухают;
  • После приступа выделяется вязкая мокрота, может возникать рвота.

В период обратного развития симптоматика ослабляется и через некоторое время исчезает.

Диагностика коклюша: основные методы исследования

Анализы на коклюш, диагностика коклюша, обследования

Для бакпосева делают забор слизи из задней стенки глотки. Процедура должна осуществляться утром натощак или же через 2-3 часа после приема пищи. Также могут применять метод «кашлевых пластинок» для изучения выделившихся капель мокроты. Но он малоэффективен при заборе отделяемой слизи у деток, которые «плохо» кашляют.

Бактериологический посев производят на казеиново-угольный агар. Результат диагностики после прорастания микроорганизма получают через 3-7 суток. Такой анализ будет информативным, если взять забор слизи у пациента, кашляющего не более месяца. Дальше возбудитель не выделяется.

Также расшифровка будет ложной, если пациент принимает антибиотики. Бакпосев помогает отличить коклюш от туберкулеза, бронхиальной астмы, ОРВИ, пневмонии.

Заключается в исследовании сыворотки человеческой крови на наличие антител или иммуноглобулинов IgM (на раннем сроке) и IgG (на позднем сроке) к антигенам коклюшного микроба. Наиболее достоверный лабораторный метод – это иммуноферментный анализ (ИФА). Он позволяет не только определить болезнетворного возбудителя, но и понять, на какой стадии находится болезнь по количеству антител.

Серологическая диагностика коклюша эффективна, потому что после проникновения инфекции в организме человека сразу же вырабатываются иммунные защитные комплексы. В сыворотку крови лаборант добавляет антиген заболевания и после химических реакций выдает результат.

Расшифровка анализа крови на коклюш серологическим методом показывает, есть ли в сыворотке пациента антитела к палочке Бордетелла.

Повышение титра IgG или IgM в четыре раза подтверждает диагноз острого течения болезни. Слабое увеличение титра может свидетельствовать о перенесенном ранее коклюше, о недавней вакцинации АКДС.

Показатель «0» — это норма и говорит об отсутствии анаэробной инфекции.

Иммуноферментный анализ крови сдают дважды. Первый раз для выявления болезнетворного возбудителя. А второй – чтобы понять, насколько динамично развивается воспалительный процесс.

Очень часто для диагностики коклюша используют иммунофлюоресцентный способ обследования (РНИФ) отделяемого со стенки глотки. Он обнаруживает антитела за 2-6 часов.

Латексная микроагглютинация (ЛМА) – это очень быстрый диагностический способ выявить возбудителя коклюша. Процедура длится всего 30-40 минут.

Нередко анализы на коклюш у детей и взрослых на раннем сроке заболевания проводят с помощью ПЦР – полимеразная цепная реакция. Он основан на выявлении ДНК палочки Бордетеллы, поэтому в 100% случаев определяет, есть ли возбудитель в организме или его нет.

ПЦР является информативной диагностической процедурой, поскольку она не зависит от реакции организма на инфекцию, как при ИФА. Молекулярный метод выявляет конкретного микроба даже в инкубационный период, когда еще нет никаких симптомов заболевания. А при коклюше, с продолжительным сроком «тихого» развития, он как раз будет идеальным лабораторным исследованием.

Но для получения точного результата анализа и его расшифровки необходимо сохранить чистоту биологического материала.

Если на образец случайно попадет чужой фрагмент ДНК палочки коклюша (из воздуха или каких-то других предметов), то может возникнуть «ложное срабатывание».

А отсутствие инфекции по показателям анализа при явных симптомах заболевания случается, если материал взят неправильно (мазок не из зева или носоглотки).

Подготовка к сдаче анализа: основные правила

Анализы на коклюш, диагностика коклюша, обследования

  1. За день до сдачи анализа рекомендовано соблюдать диету – снизить потребление жирной пищи, сладостей, алкогольных напитков. Желательно исключить стрессовые ситуации и серьезные физические нагрузки.
  2. Забор крови производится натощак утром из локтевой вены (у детей 5 мл, у взрослых до 10 мл). Воду пить разрешено. От последнего приема ужина отсчитывают минимум 8 часов.
  3. Повторное обследование нужно пройти спустя две недели после первой серологической диагностики.
  4. Если больной принимает медикаменты, включая антибиотики, он должен рассказать название и дозировку доктору.

В основном перед забором анализов в лаборатории сотрудники предупреждают о том, как правильно сдавать кровь. В профессиональных учреждениях есть свои сайты, где указано, каких правил нужно придерживаться перед приходом к лаборанту. В Инвитро и других крупных медицинских компаниях результаты анализов максимально точные, главное, соблюдать указания врача, чтобы не исказить полученные данные.

В расшифровке серологической диагностики показывают, какой должна быть норма показателей крови.

Если в анализе пациента содержится значительное количество антител, которое при повторном обследовании увеличивается, значит, диагноз коклюш подтверждается.

Незначительное повышение уровня иммуноглобулинов или антител может говорить о сформировавшемся иммунитете к перенесенному инфекционному заболеванию.

Если пациента направляют на неспецифический гематологический анализ крови с пальца, тогда специальной подготовки не требуется. Главное условие – проводить забор натощак утром. Если по результатам анализа в крови повышенное количество лейкоцитов и нейтрофилов, но СОЭ в норме, то такие изменения характерны для коклюша.

Подготовка к ПЦР и бактериологическому методу исследования

Если при сдаче анализа крови существует не так много ограничений, то для проведения бакпосева или молекулярного способа диагностики очень важно получить чистый биологический материал без примесей каких-либо добавок (пищевых, лекарственных и др.). Также большое значение имеет профессионализм лаборанта, который будет брать мазок слизи из зева или носоглотки. Если забор производится не из того места, где сосредоточен инфекционный возбудитель, результат анализа будет ложным.

Перед сдачей слизистого отделяемого из ротоглотки нужно придерживаться следующих правил:

  • Не принимать пищу или спиртных напитков в течение четырех часов до посещения лаборатории;
  • Запрещено чистить зубы натощак, иначе образец материала будет смыт или испорчен;
  • Не принимать лекарственных средств перед сдачей анализа;
  • Рекомендовано только прополоскать рот обычной кипяченой водой без добавок.

Где можно сдавать анализ на коклюш?

В настоящее время есть множество различных государственных или частных медучреждений, которые предлагают лабораторную диагностику различных возбудителей.

Можно воспользоваться бесплатным проведением анализов в поликлинике по месту жительства или прибегнуть к услугам комфортных лабораторий, где есть все необходимые реагенты и материалы, чтобы получить максимально точные результаты диагностики.

Цена таких исследований на наличие возбудителя коклюша зависит от выбранного медучреждения.

В профессиональных частных лабораториях результаты анализов выдают с расшифровкой. Пациент самостоятельно может понять, какие у него показатели – в норме или свидетельствуют о наличии инфекционного агента. После этого врач, если потребуется, назначит эффективное лечение или направит на дополнительное обследование.

Источник: https://diagnos-med.ru/analiz-na-koklyush-sovremennye-metody-diagnostiki/

Анализ крови на коклюш: когда и как сдавать? — Здоровая кровь

Анализы на коклюш, диагностика коклюша, обследования

Коклюш – острое инфекционное заболевание органов дыхания, основным проявлением которого является длительный приступообразный кашель. Болеют коклюшем люди любого возраста – у кого нет достаточного иммунитета после вакцинации, тот в зоне риска.

Однако тяжелее всего переносят недуг маленькие дети, у них часто возникают осложнения со стороны нервной системы, расстройства дыхания и кровообращения.

Своевременная диагностика коклюша в большинстве случаев позволяет избежать затягивания болезни и развития осложнений.

1. Почему важно своевременно диагностировать коклюш 2. В каких случаях показано обследование на коклюш 3.

Анализы при подозрении на коклюш – Бактериологический анализ отделяемого глотки на коклюш – Выявление возбудителя коклюша методом ПЦР – Определение концентрации специфических антител в крови – Общий анализ крови при коклюше 4. Стоимость анализов на коклюш 5. Где можно сдать анализы на коклюш

Коклюш вызывают бактерии Bordetella pertussis. Они выделяются больным в окружающую среду во время кашля и чихания на протяжении практически всей острой фазы болезни (в среднем 20 дней).

С этими микроорганизмами можно бороться с помощью антибиотиков, однако чтобы был эффект, лечение должно быть назначено на ранней стадии заболевания.

Вообще в течении коклюша выделяют четыре периода:

  • инкубационный (длится 10-14 суток от момента заражения) – время, необходимое микроорганизму для проявления своих патогенных свойств;
  • продромальный или катаральный (длится 3-14 дней) – появляются первые признаки болезни, не отличающиеся особо от таковых при обычном ОРЗ, – сухой кашель, субфебрильная температура;
  • спазматический (длится 4-6 недель) – период специфического коклюшного кашля:
  • фаза реконвалесценции – восстановления и выздоровления.

По клинической картине диагностировать коклюш можно только в третьем периоде заболевания, но для начала специфической антибактериальной терапии, позволяющей остановить прогрессирование патологии, это уже поздно.

Оптимальное время для лечения антибиотиками – первая неделя заболевания, то есть продромальный период.

Отсюда выплывает первое преимущество своевременной диагностики коклюша – возможность проведения специфического лечения болезни.

Если коклюшем заболеет маленький ребенок (до года), которому не были сделаны противококлюшные прививки, течение недуга будет очень тяжелым. У таких деток возникают серьезные осложнения со стороны нервной, сердечно-сосудистой и респираторной системы, требующие оказания помощи в условиях реанимации.

К сведению! По данным Американского центра по контролю за инфекционными болезнями, ежегодно в мире коклюшем заболевает приблизительно16 млн. человек, около 200 тис.   случаев недуга заканчивается летально, большинство умирающих – малыши первого года жизни.

У детей постарше, не прошедших курс вакцинации, риск тяжелого течения коклюша ниже, но есть. У больных может развиться пневмония, ателектаз легкого, энцефалопатия, судороги.

  1. Однако если заболевание будет выявлено своевременно, врачи смогут приложить все усилия для стабилизации состояния пациента и недопущения возникновения осложнений – этовторое преимущество своевременной диагностики коклюша.
  2. У правильно вакцинированных детей, подростков, взрослых людей коклюш, как правило, не развивается, а если и развивается, то в виде стертой или малосимптомной формы болезни.
  3. Такие больные представляют не меньшую опасность для окружающих, чем больные с явными признаками коклюша, поскольку и первые, и вторые выделяют инфекцию в окружающую среду с кашлем.

Если же заболевание будет выявлено и будет начата антибиотикотерапия, заразность больного резко снизиться, соответственно другие члены семьи (особенно маленькие дети) не будут подвергаться риску инфицирования опасной бактерией. Это еще одно преимущество ранней диагностики коклюша.

В каких случаях показано обследование на коклюш

Лабораторное обследование на коклюш рекомендуется проводить следующим категориям населения:

  • детям, кашляющим более 5-7 дней (особенно если кашель имеет приступообразный характер);
  • лицам, которые тесно контактировали с больным коклюшем дома, в садике, в школе, на работе;
  • взрослым с подозрением на коклюш (особенно если в семье есть грудные дети или же если больной является работником детского учреждения).

Роль взрослых в распространении коклюша среди детей очень высокая – это доказали многочисленные научные исследования.

У взрослых болезнь протекает зачастую как затянувшееся ОРЗ, а кашель не имеет характерных для рассматриваемого заболевания черт.

Поэтому многие врачи и сами больные не задумываются о коклюше, считая его исключительно детской болезнью. В таких ситуациях пролить свет на истинную причину недомогания может только лабораторная диагностика.

Анализы при подозрении на коклюш

Диагностика коклюша проводится следующими методами:

  • бактериологическим (посев на питательные среды);
  • молекулярно-генетическим (обнаружение ДНК возбудителя коклюша);
  • серологическим (определение концентрации в крови специфических антител).

Для каждого из этих исследований есть свои сроки проведения, если их не соблюдать информативность и достоверность анализа значительно понижается.

Бактериологический анализ отделяемого глотки на коклюш

Оптимальный срок для забора материала на бактериологический анализ – это 5-7 дни болезни. Если недуг длится 3 и более недель – исследование будет малоинформативным.

  • Кроме того, материал должен быть взят до начала антибиотикотерапии, в ином случае возможны ложноотрицательные результаты, при которых роста микроорганизмов на питательных средах нет, а инфекционное заболевание есть.
  • Чтобы повысить достоверность бактериологического исследования, его проводят двукратно, например, на 5 и 6 дни болезни.
  • В лабораторных условиях возбудителя коклюша выращивают на искусственных средах, которые отличаются от естественной среды обитания данной бактерии.

Поэтому очень важно, чтобы в ходе забора материала медицинский работник смог захватить как можно больше биомассы микроорганизма из глотки пациента.

Для этого перед походом в лабораторию обследуемый не должен чистить зубы, кушать, пить, полоскать рот и горло. Если это условие нарушено, сдавать материал можно будет не ранее чем через 2-3 часа.

  1. Выделения для анализа на коклюш забирают специальным тампоном с задней стенки глотки в инфекционной больнице или прямо в лаборатории.
  2. Далее материал сеют на питательные среды, в которых хорошо растет и размножается возбудитель коклюша.
  3. Есть еще один метод забора слизи для исследования – открытую чашку с питательной средой подносят непосредственно ко рту обследуемого во время кашлевого приступа.

Предварительный результат бактериологического анализа можно получить уже на 2-3 день после посева, а заключительный – только через 5-7 суток. Bordetella pertussis на искусственных средах растет достаточно медленно, поэтому бактериологом необходимо время для точной идентификации микроорганизмов.

Выявление возбудителя коклюша методом ПЦР

  • Материалом для данного исследования служит соскоб с задней стенки глотки.
  • Эффективность метода ПЦР в диагностике коклюша является самой высокой (около 80%), ложноотрицательные результаты встречаются редко.
  • Проводится такой анализ в первые 3-4 недели заболевания, то есть когда в слизистой дыхательных путей еще присутствует Bordetella pertussis.
  • Особенности подготовки: нельзя чистить зубы, кушать и пить минимум за 2-3 часа до исследования, непосредственно перед взятием материала можно пополоскать рот кипяченой водой.

Определение концентрации специфических антител в крови

Серологическое исследование применяется для диагностики коклюшной инфекции на поздних сроках ее развития – приблизительно с 3 недели заболевания. 

В это время описанные выше методы оказываются малоэффективными, поскольку возбудителя в дыхательных путях уже нет, а сохранение кашля связано с остаточными воспалительными явлениями и перевозбуждением кашлевого центра в головном мозге.

В ходе серологической диагностики коклюша определяют титры антител к антигенам Bordetella pertussis трех классов:

  • иммуноглобулины М – появляются на 2 недели заболевания;
  • иммуноглобулины А – синтезируются с 2-3 недели;
  • иммуноглобулины G – обнаруживаются только после 3 недели недуга.

Основным методом серологической диагностики коклюша является иммуноферментный анализ (ИФА). Исследуемый материал – венозная кровь.

Подготовка к сдаче крови должна быть такой же, как и перед другими анализами: приходить в лабораторию необходимо утром натощак, за 12 часов до исследования желательно исключить физические нагрузки и не принимать лекарственные средства, если это возможно.

Особенностью серологической диагностики коклюша является необходимость в исследовании парных сывороток, то есть проведении двух анализов с промежутком в 10-14 дней. Такая тактика дает возможность выявить нарастание титров антител, которое говорит в пользу развивающегося заболевания, а не иммунитета, приобретенного вследствие ранее перенесенного коклюша или вакцинации.

Согласно рекомендациям ВОЗ подтверждением наличия коклюша у невакцинированных от этой инфекции детей является нарастание уровня антител Ig М и Ig А к одному или нескольким антигенам Bordetella pertussis. Для оптимальной лабораторной диагностики одновременно должны использоваться два метода исследования: бактериологический посев и серологический анализ крови.

Общий анализ крови при коклюше

  • Данный метод исследования не является специфическим и не может подтвердить или опровергнуть диагноз «Коклюш».
  • Единственное предназначение этого анализа – выявление воспалительного процесса и коррекция плана дальнейшего обследования.
  • Врач может заподозрить коклюш при наличии у пациента соответствующей клинической картины и высокого лимфоцитоза и лейкоцитоза в результате общего анализа крови.

Стоимость анализов на коклюш

  1. Обратите внимание
  2. Цены могут существенно отличаться в каждом из городов РФ.

В частных клиниках и лабораториях бактериологическое исследование на коклюш стоит в среднем 1,5 тыс. рублей. Определение титра антител к коклюшу обойдется по 750-800 рублей за каждый иммуноглобулин.

Приблизительно такая же цена и у анализа глоточного соскоба на коклюш методом ПЦР.

Дополнительно оплачивается услуга по забору материала: мазки и соскобы – 300-400 рублей, взятие венозной крови – 100-150 рублей.

Источник: https://krovzdorov.ru/analiz-krovi-na-koklyush-kogda-i-kak-sdavat.html

Коклюш

Коклюш – острая антропонозная инфекционная болезнь с воздушно-капельным механизмом передачи возбудителя, вызываемая коклюшным микробом и характеризующаяся длительным своеобразным спазматическим кашлем с поражением дыхательной, сердечно-сосудистой и нервной систем. Возбудитель коклюша – Bordetella pertussis – грамотрицательная коккобацилла, относится к роду Bordetella. Помимо B. pertussis респираторные инфекции у людей могут вызывать B.parapertussis и B.bronchiseptica.

B.parapertussis вызывает паракоклюш – заболевание, подобное коклюшу, но с более легким течением. Перекрестный иммунитет в отношении коклюша и паракоклюша отсутствует. B.

bronchiseptica вызывает бронхисептикоз (бордетеллез), протекающий как ОРВИ, возникающий при контакте с инфицированным животным, у людей с ослабленной иммунной системой может вызывать пневмонию. Выделяют типичные (кашель имеет приступообразный характер) и атипичные (отсутствует спастический кашель) формы коклюша.

В течении типичных форм коклюша различают 4 периода: инкубационный (в среднем 14 дней), катаральный (1–2 недели), период спазматического кашля (4–6 недель) и период разрешения.

Выраженность клинических проявлений зависит от тяжести заболевания, оцениваемой по: длительности катарального периода, частоте приступов кашля, наличию цианоза лица при кашле, гипоксии вне приступов кашля, степени нарушения работы сердечно-сосудистой системы, наличию и степени выраженности энцефалических расстройств.

Диагноз коклюша считается подтвержденным, если имеется соответствие клиническому стандартному определению случая коклюша, лабораторное подтверждение и/или имеется эпидемиологическая связь с лабораторно подтвержденным случаем. Возможно сочетанное инфицирование с другими возбудителями ОРЗ, что отягощает течение болезни.

Показания к обследованию. Диагностика: больные с подозрением на коклюш и паракоклюш (в соответствии со стандартным определением случая*), а также длительно (5–7 дней и более) кашляющих, независимо от указаний на контакт с больными.

По эпидемическим показаниям: дети и взрослые в детских учреждениях, родильных отделениях и детских больницах, в которых были выявлены больные коклюшем.

Дифференциальная диагностика

  • Острые бронхиты, вызванные Mycoplasma pneumoniae, Chlamydophila pneumoniae, вирусными возбудителями респираторных инфекций;
  • аспирация инородного тела;
  • муковисцидоз;
  • лимфогранулематоз.

Материал для исследований

  • Заднеглоточный мазок – культуральное исследование;
  • носоглоточный мазок – культуральное исследование;
  • мазки со слизистой носоглотки и ротоглотки – выявление ДНК микроорганизмов;
  • гортанно-глоточные смывы – обнаружение АГ;
  • сыворотка крови – обнаружение АТ.

Этиологическая лабораторная диагностика включает выделение чистой культуры бордетелл и определение их видовой принадлежности; выявление ДНК B.pertussis, B.parapertussis, B.Bronchiseptica методом ПЦР, выявление АГ B. pertussis в гортанно-глоточных смывах с использованием РНИФ; обнаружение специфических АТ.

Сравнительная характеристика методов лабораторной диагностики. При выявлении бордетелл выполняют выделение чистой культуры микроорганизмов и определение их видовой принадлежности методами микроскопии, постановкой РА с видоспецифическими сыворотками, проведением биохимических тестов и оценкой подвижности микроба.

Культуральный метод характеризуются большой продолжительностью исследования, его диагностическая чувствительность не превышает 10–20%; аналитические характеристики во многом зависят от качества используемых сред (добавление крови животных является обязательным условием) и реагентов для иммунологических и биохимических идентификационных тестов.

Обнаружение ДНК методом ПЦР наиболее эффективно и востребовано для ранней диагностики, наибольшими диагностическими возможностями обладают методики, позволяющие обнаруживать и дифференцировать значимые для человека виды Bordetella с чувствительностью 5 x 102 – 1 x 103 ГЭ/мл исследуемого материала со специфичностью 100%.

Выявление АТ позволяет диагностировать коклюш на поздних сроках. Обнаружение специфических АТ проводят с использованием: РА для диагностики коклюша и паракоклюша, ИФА для обнаружения АТ (Ig M, A, G) к различным антигенам B.pertussis и B.parapertussis.

Выявление специфических IgА методом РНИФ практически не используется по причине отсутствия стандартизации; чувствительность анализа, по данным авторов метода, варьирует в широком диапазоне от 103 до 105 микробных клеток в 1 мл, при этом положительные результаты исследования можно учитывать только при наличии типичной симптоматики коклюша.

Показания к применению различных лабораторных исследований. Культуральное исследование с диагностической целью следует проводить в ранние сроки заболевания (1–2 недели болезни); в более поздние сроки высеваемость возбудителя резко снижается. Оптимальное время для обнаружения ДНК методом ПЦР – до 3-х недель от начала заболевания.

Определение АТ целесообразно с 3-й по 6-ю недели от начала заболевания, далее титры АТ начинают снижаться.

У детей до 6 лет, вакцинированных против коклюша, можно использовать только пробы крови, взятые в динамике (парные сыворотки), причем первый раз кровь берется не ранее чем через 3 недели от начала заболевания, повторно – спустя 2 недели.

Особенности интерпретации результатов лабораторных исследований. Диагноз коклюша считается лабораторно подтвержденным в случае выделения культуры B.pertussis; обнаружения специфического фрагмента генома B.

pertussis методом ПЦР; выраженной сероконверсии (увеличение в 4 и более раз уровня специфических IgG и/или IgA в парных сыворотках, или обнаружении у не привитого пациента специфических IgM). Диагностическим титром реакции агглютинации у не привитых и не болевших детей считают разведение 1:80.

Необходимо учитывать, что у детей в возрасте до 3 месяцев могут присутствовать материнские АТ, но, как правило, в низких титрах. Диагноз коклюш, вызванный B.parapertussis, ставится в случае выделения культуры B.parapertussis или обнаружения специфического фрагмента генома B.

parapertussis методом ПЦР, или при обнаружении АТ методом РА в титре не менее 1:80. Заболевание, вызванное B.bronchiseptica, диагностируется при выделении культуры или обнаружения специфического фрагмента генома методом ПЦР.

Стандартное определение случая заболевания коклюшем – острое заболевание, характеризующееся: сухим кашлем с постепенным его усилением и приобретением характера приступообразного спазматического на 2-3 неделе заболевания, особенно в ночное время суток или после физической и эмоциональной нагрузки; явлениями апноэ, гиперемией лица, цианозом, слезотечением, рвотой, лейко- и лимфоцитозом в периферической крови, развитием «коклюшного легкого», жестким дыханием, отделением вязкой мокроты; незначительным повышением температуры.

Источник: https://www.cmd-online.ru/vracham/spravochnik-vracha/koklyush/

Лабораторная диагностика коклюша и паракоклюша

  • Комплексное исследование, направленное на диагностику коклюша и паракоклюша, а также на оценку эффективности вакцинации против коклюша.
  • Синонимы русские
  • Возбудители коклюша, паракоклюша; комплексное обследование.
  • Синонимы английские
  • Bordetella pertussis, Bordetella parapertussis; comprehensive examination.
  • Какой биоматериал можно использовать для исследования?
  • Венозную кровь, мазок из носоглотки, мазок из зева (ротоглотки).

Как правильно подготовиться к исследованию?

За 3-4 часа до взятия мазков из ротоглотки (зева) не употреблять пищу, не пить, не чистить зубы, не полоскать рот/горло, не жевать жевательную резинку, не курить. За 3-4 часа до взятия мазков из носа не закапывать капли/спреи и не промывать нос. Взятие мазков оптимально выполнять утром, сразу после ночного сна.

Общая информация об исследовании

Коклюш представляет собой острую антропонозную бактериальную инфекцию. Возбудитель – Bordetella pertussis (палочка Борде — Жонгу), мелкая неподвижная грамотрицательная коккобацилла, строгий аэроб. Инфекция передается воздушно-капельным путём. Источником инфекции является больной человек с любой формой инфекционного процесса.

В течении заболевания выделяют следующие периоды: инкубационный период (длительностью от нескольких дней до двух недель), катаральный (от 5-8 до 11-14 дней), пароксизмальный, или спазматический (2-8 недель), разрешения (2-4 недели) и реконвалесценции (2-6 месяцев).

Наиболее характерными для коклюша являются проявления, характеризующие пароксизмальный период заболевания. К ним относятся сухой спастический кашель, цианоз носогубного треугольника, акроцианоз, возможна рвота, лихорадка, слабость, в гемограмме – лейкоцитоз, лимфоцитоз.

Следует отметить, что наиболее тяжело заболевание протекает у детей раннего возраста, возможно развитие осложнений со стороны бронхолегочной и нервной систем. У взрослых и лиц после вакцинации коклюш чаще протекает в легкой, атипичной форме, как правило, без осложнений.

Паракоклюш – это острая бактериальная инфекция респираторного тракта, поражающая детей и взрослых. Возбудителем инфекции является аэробная палочка Bordetella parapertussis. Клинические проявления данного заболевания схожи с картиной коклюша, характерна более стертая смена периодов, легкое течение, редкое развитие осложнений, преимущественно у детей.

Диагностика коклюша и паракоклюша основана на клинико-эпидемиологических данных, результатах изменений в клиническом анализе крови и подтверждается лабораторными методами.

В клинической лабораторной диагностике данных заболеваний применяют несколько методов: бактериологический метод для выявления роста колоний возбудителей коклюша/паракоклюша; серологический метод, направленный на определение суммарных антител к данным возбудителям; метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) – для выявления генетического материала возбудителя коклюша.

Бактериологическое обследование является первым этапом диагностики, но позволяет выявлять возбудителей только на ранних сроках заболевания, в первые 2-3 недели.

Метод ПЦР является высокоэффективным в диагностике коклюша, позволяет выявлять фрагменты ДНК возбудителя B. pertussis в исследуемом биоматериале, обладает высокой диагностической специфичностью, достигающей 100 %.

Использование данного метода рекомендовано в первые три недели от начала клинических проявлений заболевания, то есть в катаральный и ранний пароксизмальный период. В более поздние сроки заболевания диагностическая чувствительность метода падает.

Следует отметить, что в отличие от других лабораторных методов ПЦР эффективна на фоне лечения антибактериальными препаратами. Также она используется при обследовании детей раннего возраста, в отличие от более старших детей и взрослых, когда возможно возрастание числа ложноположительных результатов.

У лиц, вакцинированных против коклюша, положительный результат данного метода может свидетельствовать о транзиторном носительстве патогена, а не об активной форме заболевания.

Серологическое обследование позволяет выявлять в сыворотке крови специфические антитела, направленные к антигенам возбудителей B. pertussis и B. parapertussis. Они могут быть обнаружены с помощью реакции непрямой гемагглютинации (РНГА).

При выборе РНГА в качестве диагностического теста при подозрении на коклюш и паракоклюш следует учитывать клинический период заболевания, возраст пациента и наличие предшествующей вакцинации. Для подтверждения диагноза необходимо определение нарастания титра антител в четыре и более раза в парных сыворотках, взятых с интервалом 10-14 дней.

Реакцию ставят параллельно с коклюшным и паракоклюшным антигеном. Серологическое обследование рекомендовано применять в период 3-6 недель от начала первых клинических симптомов заболевания, характеризующий пароксизмальный период коклюша.

Данный метод не рекомендуется применять детям до 3 месяцев, так как иммунная система новорождённых в это время ещё незрелая и могут быть обнаружены материнские антитела в низких титрах.

Также не рекомендуется проводить серологическое исследование лицам в течение 1 года после вакцинации против коклюша вследствие невозможности различить иммунный ответ на вакцинацию или на первичную инфекцию. Титр антител к B. pertussis может быть определен для оценки эффективности прививки против коклюша у детей.

Для чего используется исследование?

  • Для комплексной лабораторной диагностики коклюша и паракоклюша.
  • Для диагностики коклюша в первые три недели от начала заболевания, характеризующие катаральный и ранний пароксизмальный период, а также на фоне лечения антибактериальными препаратами.
  • Для диагностики коклюша и паракоклюша в спазматический (пароксизмальный) период заболевания.
  • Для оценки эффективности вакцинации против коклюша.

Когда назначается исследование?

  • При клинических проявлениях коклюша/паракоклюша: сухой спастический кашель, сопровождающийся глубоким свистящим вдохом, рвотой, цианозом носогубного треугольника, акроцианоз, лихорадка, слабость, насморк, слезотечение.
  • При обследовании лиц, находившихся в тесном контакте с больными коклюшем/паракоклюшем.
  • При оценке эффективности вакцинации против коклюша.

Что означают результаты?

  • Референсные значения
  • 1. anti-Bordetella pertussis
  • Результат: отрицательный.
  • Титр: после вакцинации: 1:160.
  • 2. anti-Bordetella parapertussis
  • Результат: отрицательный.
  • Титр: < 1:80.
  • 3. Bordetella pertussis, ДНК
  • Результат: не обнаружено.
  • Причины положительного результата:
  • коклюш;
  • паракоклюш;
  • транзиторное носительство;
  • иммунный ответ после вакцинации.

Причины отрицательного результата:

  • отсутствие коклюша/паракоклюша;
  • неэффективная вакцинация против коклюша;
  • снижение иммунологического ответа после вакцинации;
  • ложноотрицательные результаты.

Что может влиять на результат?

  • Клинический период заболевания, возраст пациента, наличие предшествующей вакцинации;
  • применение антибактериальных препаратов в зависимости от стадии (периода) заболевания и применяемого метода лабораторной диагностики;
  • особенности иммунного ответа у новорождённых детей;
  • предшествующая вакцинация.

Важные замечания

  • При интерпретации результатов обследования необходимо учитывать методы диагностики, возраст пациентов, клиническую стадию (период) заболевания, предшествующую вакцинацию.
  • Для комплексной оценки полученных результатов их необходимо сопоставлять с эпидемиологическими, клиническими и другими лабораторными данными.

Источник: https://helix.ru/kb/item/40-170

Ссылка на основную публикацию
Adblock
detector